WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!


Pages:     | 1 |   ...   | 102 | 103 || 105 | 106 |   ...   | 140 |

и др., 1996]. Специ­фическое лечение женщин на ранних стадиях инфекционного процесса снижает риск пора­жения плода на 60 %. В результате внутриутробного токсоплазмоза могут произойти внутри­утробная гибель плода (самопроизвольный аборт) или рождение ребенка с серьезными пора­жениями: гидроцефалия, кальцификаты в ткани мозга, хориоретинит. Поскольку антитела IgM не проникают через плаценту, обнаружение их в крови новорожденного свидетельствует о врожденной инфекции. Определение антител IgM необходимо для диагностики острого периода токсоплазменной инфекции.

Антитела IgG появляются в период реконвалесценции и у переболевших сохраняются до 10 лет. Определение антител IgG служит для диагностики периода реконвалесценции токсо­плазмоза и для оценки напряженности поствакцинального иммунитета.

Криптоспоридиоз Возбудителем криптоспоридиоза являются мелкие кокцидии (простейшие), семейства Cryptosporidae, паразитирующие в поверхностном слое эпителия слизистой оболочки желуд­ка, тонком и толстом кишечнике. Криптоспоридиоз — протозойная инвазия человека и жи­вотных. О криптоспоридиозе следует думать при появлении поноса у каждого больного с на­рушениями иммунного статуса. Диагностика заболевания основана на выявлении антигенов Cryptosporidae в кале.

Определение антигенов Cryptosporidae методом прямой иммунофлюоресценции Антигены Cryptosporidae в исследуемом материале в норме отсутствуют.

Исследуют фекалии больных немедленно после их получения на наличие овоцист криптоспоридий методом иммунофлюоресценции. Метод является весьма чувствительным и спе­цифичным. При выявлении в мазке даже одного флюоресцирующего пятна исследование считается положительным. Сероконверсия происходит в пределах 60 дней острой фазы инва­зии как у больных с нормальным иммунным статусом, так и у больных СПИДом.

СЕРОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ПАРАЗИТАРНЫХ ИНФЕКЦИЙ Эхинококкоз Эхинококкоз, тканевой гельминтоз, вызываемый личиночными стадиями E.granulosus или E.multilocularis. У человека E.granulosus вызывает образование кист главным образом в печени и легких, a E.multilocularis — образование многокамерных (альвеолярных) очагов по ражения, обладающих способностью к инвазивному росту в прилегающих тканях.

Диагнос­тика заболевания представляет определенные трудности. Если при разрыве эхинококковой кисты или истечении из нее жидкости развивается анафилактическая реакция с эозинофилией и повышением содержания IgE, то можно заподозрить эхинококкоз. Однако эозинофилия отмечается менее чем в 25 % случаев.

Антитела к эхинококку в сыворотке Антитела к эхинококку в крови в норме отсутствуют.

Для диагностики эхинококкоза разработаны серологические методы диагностики:

РНГА, РСК, реакция латексагглютинации с антигеном из жидкости эхинококковых пузы­рей. Однако использование этих методов ограничено тем, что у многих носителей эхинокок­ковых кист иммунный ответ не развивается и антитела в крови не образуются. РНГА дает положительные результаты у 90 % больных с кистами в печени и только у 50—60 % больных с поражением легких. После хирургического удаления кист определение антител к эхинокок­ку в сыворотке служит для контроля за радикальностью проведенной операции. Исчезнове­ние антител через 2—3 мес после операции говорит о радикальности удаления кисты, сниже­ние уровня антител и последующий рост их уровня в послеоперационном периоде — о реци­диве кисты.

Определение антител к эхинококку необходимо для диагностики эхинококкоза при абс­цессах печени, кистах печени, почек, головного мозга, легких.

Токсокароз Токсокароз — широко распространенное заболевание. Возбудитель токсокароза — не­матода Toxocara canis, которая обычно паразитирует у собак, волков, лисиц и других пред­ставителей семейства псовых. Инфицированность этих животных у нас в стране составляет от 10 до 70 %, среди людей число больных составляет человек на 100 тыс. населения. Клинические симптомы заболевания разнообразны. В зависимости от преобладающих симп­томов выделяют висцеральную форму — 23 % и глазную — 67 % [Дедкова Л.М., 1996]. Ток­сокароз по клиническим проявлениям нередко напоминает аскаридоз. Наиболее постоян­ным симптомом токсокароза является высокая эозинофилия периферической крови — до 60—80 %. При тяжелых формах заболевания могут быть обнаружены гранулематозные пора­жения различных органов и тканей.



Диагностика токсокароза сложна. Это обусловлено тем, что в организме человека токсокары не достигают половозрелого состояния, поэтому нельзя выявить взрослых особей или их яйца в образцах кала или дуоденального содержимого, как при других гельминтозах.

Антитела к Toxocara canis в сыворотке Диагностический титр антител к Toxocara canis в сыворотке 1:12 800 и выше.

Основным методом диагностики токсокароза является обнаружение антител к Toxocara canis в сыворотке крови методом ИФА. Степень повышения уровня антител в крови тесно коррелирует с тяжестью течения заболевания. Повторные исследования уровня антител в крови больного позволяют оценивать эффективность проводимого лечения — об эффектив­ности говорит снижение уровня антител.

Пневмоцистоз Возбудитель пневмоцистоза — условнопатогенный почкующийся дрожжевой паразит Pneumocystis carinii. Паразит существует в двух формах: прециста — овальная, имеющая одно ядро, и циста, имеющая 2—8 ядер и форму розетки. Паразиты размножаются путем деления, после ряда делений наступает спорогония, завершающаяся образованием цисты. Пневмоцисты обитают в альвеолах легких различных животных и человека, факультативно патоген­ны. Заболевание характеризуется интерстициальной пневмонией со склонностью к хрони­ческому течению.

Определение антигенов Pneumocystis carinii методом прямой флюоресценции в мокроте Антигены Pneumocystis carinii в мокроте в норме отсутствуют.

Пневмоцисты редко присутствуют в мокроте и слизи из трахеи, поэтому для получения адекватных материалов для исследования обычно требуются более инвазивные методы. При­менять их нужно в начале лечения заболевания.

Фибробронхоскопия с бронхоальвеолярным промыванием (лаважем) и/или трансбронхиальной биопсией — наиболее широко используе­мые методы для получения материала у взрослых больных. Исследование материала, полу­ченного этими методами, дает положительные результаты выявления пневмоцист у 90 % па­циентов со СПИДом и около 40 % у других категорий больных с ослабленным иммунитетом.

При выявлении в мазке даже одного флюоресцирующего пятна исследование считается по­ложительным.

Определение антигенов Pneumocystis carinii в мокроте применяется для диагностики пневмоцистной пневмонии, в том числе при вторичных иммунодефицитах (СПИДе).

СЕРОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ГРИБКОВЫХ ИНФЕКЦИЙ Аспергиллез Возбудителем аспергиллеза являются условнопатогенные плесневые грибы рода Aspergil­lus. Заболевание характеризуется преобладанием поражения органов бронхолегочной системы.

Антитела к возбудителю аспергиллеза в сыворотке Антитела к возбудителю аспергиллеза в сыворотке в норме отсутствуют.

При серологическом исследовании антитела IgG к антигенам Aspergillus выявляют в сы­воротке крови большинства инфицированных и практически у всех больных, в легких кото­рых при рентгенологическом исследовании обнаружен грибковый «шар» (около 90 % случа­ев). Тест имеет 100 % специфичность. Важно исследовать уровень антител в динамике. Для заболевания характерно нарастание титра антител.

Кандидоз Чаще всего кандидоз вызывается Candida albicans. Candida albicans — овальные, размно­жающиеся почкованием и спорообразованием дрожжеподобные грибы. В норме кандиды — представители резидентной микрофлоры слизистых оболочек, пищеварительного канала и женских мочеполовых органов. Кандидоз чаще всего регистрируют у больных с ослабленным иммунитетом.

Антитела к Candida albicans в сыворотке Антитела к Candida albicans в сыворотке в норме отсутствуют. Диагностический титр антител больше 1:80.

Диагностика поверхностного кандидоза основана на обнаружении элементов гриба в окрашенном мазке. При висцеральных формах кандидоза большое диагностическое значе­ние имеют серологические исследования. Используют РСК и иммуноферментный метод. Антитела обнаруживают иммуноферментным методом более чем у 90 % больных уже в пер­вые 2 нед заболевания и у переболевших сохраняются до 5 лет. Для подтверждения диагноза важно следить за динамикой уровня антител, 4кратный подъем титров антител между ост­рой и реконвалесцентной стадиями позволяет предполагать этиологию заболевания, 4крат­ное снижение их уровня в процессе лечения является показателем успешной терапии заболе­вания. Серологическая диагностика при поверхностном кандидозе неэффективна, только тя­желые формы поражения кожи и слизистых оболочек сопровождаются повышением уровня антител.





25* Определение антител к Candida albicans необходимо для диагностики кандидоза различ­ной локализации:

гнойные воспалительные процессы;

воспалительные заболевания легких;

воспалительные заболевания глотки;

воспалительные заболевания половых органов.

Антиген Candida albicans в сыворотке Антиген Candida albicans в сыворотке в норме отсутствует.

Тест применяют для непосредственного выявления кандидозного антигена в крови больных с инвазивным кандидозом. Этот тест более специфичен, чем выявление антител. Величина >2 нг сывороточного кандидозного антигена при ИФА предполагает инвазивный кандидоз. Чувствительность метода у онкологических больных составляет 65—70 % при спе­цифичности 100 % [Тиц Н., 1997]. Для выявления антигена кандидоза в сыворотке исследо­вание рекомендуется проводить не реже 2 раз в неделю.

ПОЛИМЕРАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ (ПЦР) В ДИАГНОСТИКЕ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ Полимеразная цепная реакция (ПЦР), являющаяся одним из методов ДНКдиагности­ки, позволяет увеличить число копий детектируемого участка генома (ДНК) бактерий или вирусов в миллионы раз с использованием фермента ДНКполимеразы. Тестируемый спе­цифический для данного генома отрезок нуклеиновой кислоты многократно умножается (амплифицируется), что позволяет его идентифицировать. Сначала молекула ДНК бактерий или вирусов нагреванием разделяется на 2 цепи, затем в присутствии синтезированных ДНКпраймеров (последовательность нуклеотидов специфична для определяемого генома) происходит связывание их с комплементарными участками ДНК, синтезируется вторая цепь нуклеиновой кислоты вслед за каждым праймером в присутствии термостабильной ДНКполимеразы. Получается две молекулы ДНК. Процесс многократно повторяется.

Для диагностики достаточно одной молекулы ДНК, т.е. одной бактерии или вирусной частицы. Введение в реакцию дополнительного этапа — синтеза ДНК на молекуле РНК при помощи фермента обратной транскриптазы — позволило тестировать РНКвирусы, например вирус гепатита С. ПЦР — это трехступенчатый процесс, повторяющийся циклично: денатурация, отжиг праймеров, синтез ДНК (полимеризация).

Синтезированное количество ДНК иден­тифицируют методами иммуноферментного анализа или электрофореза.

В ПЦР может быть использован различный биологический материал — сыворотка или плазма крови, соскоб из уретры, биоптат, плевральная или спинномозговая жидкость и т.д. В первую очередь ЦПР применяют для диагностики инфекционных болезней, таких, как ви­русные гепатиты В, С, D, цитомегаловирусная инфекция, инфекционные заболевания, пере­дающиеся половым путем (гонорея, хламидийная, микоплазменная, уреаплазменная инфек­ции), туберкулез, ВИЧинфекция и т.д. ПЦР используют также для диагностики злокачест­венных заболеваний, например ретинобластомы, Вклеточной лимфомы. Этот метод реко­мендуется и для диагностики наследственных заболеваний, дородового определения пола плода, ДНКдактилоскопии в криминалистике, проведения санитарногигиенических иссле­дований объектов питания и водоснабжения.

Преимущество ПЦР в диагностике инфекционных заболеваний перед другими метода­ми исследований заключается в следующем:

возбудитель инфекции может быть обнаружен в любой биологической среде организ­ ма, в том числе и материале, получаемом при биопсии;

возможна диагностика инфекционных болезней на самых ранних стадиях заболева­ ния;

возможность количественной оценки результатов исследований (сколько вирусов или бактерий содержится в исследуемом материале);

высокая чувствительность метода (достаточно для диагностики наличия 1—5 копий возбудителя в пробе).

Обнаружение вируса гепатита С Вирус гепатита С в материале в норме отсутствует.

Pages:     | 1 |   ...   | 102 | 103 || 105 | 106 |   ...   | 140 |










© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.