WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!


Pages:     | 1 |   ...   | 136 | 137 || 139 | 140 |

Эффективность расчета приведенных показателей при выполнении гемореологического анализа весьма высокая. Например, Э.К. Цибулькин и соавт. (1982) установили, что если в формулах использовать в качестве показателя концентрации вещества (С) величину гематокрита, то параметр и0 r\s = lim pj.

аналогичен характеристической вязкости и отражает главным образом гидродинамические свойства отдельных эритроцитов, в частности их геометрические пропорции.

Из приведенных материалов становится очевидным стремление исследователей увязать интегральные гемореологические параметры — предел текучести и вязкость при различных скоростях деформации со свойствами эритроцитов. Это понятно, так как их роль в неньюто­новском поведении крови наибольшая, а применительно к движению крови по сосудам, диа метр которых соизмерим с размерами эритроцита, на первый план выступают именно меха­нические свойства форменных элементов.

Повидимому, нельзя дать строгих рекомендаций в отношении того, каким из обсужда­емых критериев нужно пользоваться. Предпочтение следует отдавать тем критериям, кото­рые в большей степени соответствуют замыслу исследования. Что же касается клинической практики, то представляется целесообразным использовать наиболее доступные критерии, например расчет градиентов снижения вязкости.

Подготовка проб для реометрии обычно включает добавление к ней цитрата натрия или гепарина. В настоящее время затруднительно отдать предпочтение тому или иному способу предотвращения свертывания. Анализ данных ротационной и капиллярной реометрии здо­ровых людей показал, что между этими способами нет существенных различий. Тем не менее целесообразно придерживаться одной методики стабилизации крови.

В настоящее время важное значение имеет определение деформируемости эритро­цитов («внутренней» вязкости). S. Charm и G. Kurland (1974) описывают несколько спосо­бов определения упругих деформаций в эритроцитах: 1) реометрию эритроцитной массы (Н = 0,90—0,98); 2) фильтрационные методы, 3) гравитационные методы.

Наиболее простыми являются гравитационные методы. Сущность их состоит в центри­фугировании исследуемого образца крови, при этом чем дольше деформируемость эритроци­тов, тем плотнее будет их «упаковка» после центрифугирования. В качестве критериев оцен­ки деформируемости служат либо скорость «упаковки» форменных элементов при центри­фугировании, либо прирост слоя плазмы после повторного центрифугирования. Достоин­ствами метода являются его простота и доступность. В то же время на процесс «упаковки» форменных элементов (в цельной крови) влияют и иные факторы — концентрация белков в плазме, наличие других форменных элементов (не эритроцитов) и т.д., что повышает по­грешность методики.

Сущность фильтрационных методов сводится к определению давления, испытываемого сеткой с мелкой ячейкой при активном «продавливании» через нее исследуемого образца крови [Swan R. et al., 1964]. При измерении необходимо учитывать размеры ячеек — они не должны быть слишком крупными, так как при этом доля деформируемости в суммарном давлении на сетку уменьшается, что приводит к увеличению погрешности измерения. Чрез­мерно маленькие ячейки также приводят к большим погрешностям измерения, но уже при наличии в крови эритроцитарных агрегатов. В настоящее время популярность этого метода несколько уменьшилась.

Широко распространенным методом исследования упругости эритроцитов является ро­тационная и капиллярная реометрия эритроцитной массы, повышение вязкости которой расценивается как снижение деформируемости эритроцитов.

Перспективным для определения деформируемости эритроцитов может стать использо­вание ультразвукового метода. Такая возможность базируется на наличии зависимости ско­рости распространения и затухания акустической волны от свойств вещества. По скорости звука или ультразвука могут быть определены и упругие свойства эритроцитов.

Не менее перспективным для исследования текучести крови и деформируемости эрит­роцитов является метод ядерного магнитного резонанса [Bene G. et al., 1981].

Исследование процесса агрегации форменных элементов крови Агрегация форменных элементов крови (преимущественно эритроцитов) — один из важнейших патологических феноменов, возникающих в системе микроциркуляции. Это и обусловливает важность его количественного описания. Существует несколько способов оценки агрегации эритроцитов.



Метод, основанный на прижизненной биомикроскопии. Недостатками метода явля­ ются: субъективность в оценке степени агрегации, трудоемкость, необходимость микроско пирования. Достоинством оценки агрегации эритроцитов путем прижизненной биомикро­ скопии является возможность с абсолютной достоверностью установить фактическое нали­ чие агрегации или дезагрегации.

Реоскопия — по существу является ротационной или капиллярной (капилляр с внутренним сечением в виде щели) реометрией с той лишь особенностью, что рабочие части прибора прозрачны. Это позволяет исследовать процесс агрегации и дезагрегации в Рис. 10.20. Внешний вид агрегатограммы и определение индекса агрегации методом силлектометрии (объяснение в тексте).

зависимости от скорости деформации [Goldstone J. et al., 1970]. Использование реоскопии позволяет охарактеризовать агрегацию эритроцитов в отношении размеров и формы агре­гатов. Реоскопические исследования осуществляются со взвесями эритроцитов и с цельной кровью.

Метод оценки агрегации эритроцитов по скорости их оседания наиболее прост, но и наименее надежен. Между тем увеличенная СОЭ в подавляющем большинстве случаев сви­ детельствует о наличии феномена агрегации [Левтов В.А. и др., 1982].

Расчетный метод определения степени агрегации по L. Dintenfass (1962): его суть со­ стоит в вычислении отношения объема свободно осевших форменных элементов (при пол­ ном их осаждении) к объему форменных элементов, осажденных принудительно (центрифу­ гированием). К расчетным методам можно отнести также оценку феномена агрегации фор­ менных элементов крови по кривым течения или вязкости.

Фильтрационные методы оценки агрегации по существу аналогичны фильтрацион­ ным методикам определения деформируемости эритроцитов.

Фотометрический метод количественного определения агрегации эритроцитов. Суще­ ствует по меньшей мере два варианта его. Первый заключается в регистрации изменения оп­ тической плотности взвеси отмытых эритроцитов (100 000 ± 20 000 эритроцитов в мкл) под влиянием вещества, вызывающего агрегацию, — индуктора агрегации. В качестве индуктора используется, например, краситель алциановый голубой, который, по мнению O'Brien (1971), уменьшает заряд эритроцитов и тем самым облегчает образование конгломератов клеток. Изменения оптической плотности исследуемой суспензии эритроцитов регистриру­ ют по времени графически. Критерием оценки степени агрегации служит скорость измене­ ния оптического сигнала. Недостатком метода является длительная подготовка проб, в про­ цессе которой нарушаются существующие в цельной крови межэритроцитарные взаимодей­ ствия. Повидимому, используя этот метод, можно достоверно судить лишь о способности суспензии эритроцитов в буферном растворе с рН 7,4 изменять оптическую плотность под влиянием конкретного индуктора агрегации.

Вторым вариантом фотометрического метода является так называемая силлектометрия. В основу метода положена графическая регистрация уменьшения интенсивности света, рас­сеиваемого кровью после прекращения перемешивания исследуемого образца. Заслуга теоретической разработки этого метода принадлежит отечественным исследователям, разра­ботки которых в этом направлении обобщены в монографии «Реология крови» [Левтов В.А. и др., 1982].

В качестве основного критерия для оценки агрегации эритроцитов используется индекс агрегации, рассчитываемый как единица, деленная на время, в течение которого амплитуда агрегатограммы уменьшается вдвое (рис. 10.20). При усилении процесса агрегации эритро­цитов скорость изменения оптического сигнала возрастает и коэффициент агрегации увели­чивается. Соответственно уменьшается площадь под агрегатограммой. При нанесении дан­ных агрегатометрии на логарифмическую бумагу получается прямая линия. Тангенс угла на клона этой прямой к оси времени также может быть использован в качестве показателя агре­гации эритроцитов.

Сопоставление данных, полученных силлектометрическим методом и методом витальной микроскопии, показывает качественное совпадение результатов.





Исследование суспензионной стабильности крови Реологические параметры крови самым тесным образом связаны с ее суспензионными свойствами. Эти свойства крови характеризуются ее стабильностью, т.е.

способностью фор­менных элементов находиться во взвешенном состоянии в плазме и не взаимодействовать между собой. Таким образом, понятие суспензионной стабильности крови шире, чем поня­тие агрегации, так как агрегационная устойчивость — лишь один из факторов, определяю­щих суспензионную стабильность.

На практике обычно имеют дело с седиментационной ус­тойчивостью крови, под которой понимают способность форменных элементов оседать в стандартных условиях. Процесс оседания исследуют при помощи седиментометрии, вклю­чающей несколько методик.

Процесс седиментации форменных элементов крови весьма сложен. Его изучению по­священы детальные исследования [Чижевский А.А., 1980; Левтов В.А. и др., 1982].

В клинической практике целесообразно использовать простейшую седиментометрическую методику — построение зависимости СОЭ ~ f(t), называемую СОЭграммой. Это своего рода интегральный показатель суспензионной стабильности крови. Если кровь содержит эритроцитарные агрегаты, скорость оседания увеличивается. Увеличение скорости оседания приводит к ускоренному перемещению плазмы против сил гравитации. Ускорение этого своеобразного тока плазмы является вторичным по отношению к начальному увеличению скорости оседания за счет агрегации.

Скорость оседания форменных элементов и их агрегатов подчиняется закону Стокса:

где g — ускорение силы тяжести, р, — плотность дисперсной фазы, р2 — плотность диспер­сионной среды, г — радиус частиц, ц — вязкость дисперсионной среды.

Очевидно, что V ~ г2 и V ~ Ц. Таким образом, укрупнение частиц (или их агрегатов), т.е. увеличение г и соответствующее уменьшение вязкости плазмы (г|) ведут к закономерному увеличению скорости оседания. Характерно, что зависимость от радиуса частиц более силь­ная, так как радиус в уравнении возводится в квадрат.

СОЭграмму можно строить двумя способами: откладывая от оси ординат абсолютное значение высоты слоя плазмы или его процент по отношению к длине капилляра. При ис­пользовании стандартного капилляра длиной 0,1 м эти величины совпадают.

Следует отме­тить, что для оценки суспензионной стабильности нежелательно добавление таких количеств антикоагулянтов, которые могут разбавлять кровь, как это происходит при определении СОЭ в классическом варианте. Для предупреждения свертывания крови предпочтительнее добавлять к ней лишь небольшое количество гепарина.

Изменения реакции седиментации во времени оказываются далеко не идентичными в норме и патологии. Вероятно, целесообразно рассматривать и сравнивать площади, описы­ваемые кривыми седиментации, рассчитывая суспензионную стабильность крови (ССК) по следующей формуле:

с ССК = S = JC(t) dt, о где С — максимальный размах СОЭграммы.

Суспензионная стабильность крови, несомненно, должна оцениваться при характерис­тике ее реологических свойств. Необходимость такой оценки явствует и из чувствительности данного показателя, о которой можно судить по широкому использованию СОЭ в качестве неспецифического теста при лабораторной диагностике самых различных заболеваний. При­ложение показателей суспензионной стабильности крови к оценке ее текучести достаточно сложно, оно должно осуществляться в комплексном анализе с привлечением других показа­телей, отражающих реологические свойства, прежде всего с показателями агрегации фор­менных элементов.

Суспензионная стабильность крови и агрегация форменных элементов тесно связаны с величиной электрического заряда эритроцитов (потенциала). Заряд эритроцита определяется из соотношения G. Seaman (1971):

ЭФПti где ЭФП — электрофоретическая подвижность эритроцитов, е0 — электрическая постоян­ная, е — диэлектрическая проницаемость крови.

Электрофоретическую подвижность эритроцитов в свою очередь рассчитывают по фор­муле:

ЭФП = |, где V — скорость движения эритроцитов в электромагнитном поле; Е — напряженность электрического поля.

Pages:     | 1 |   ...   | 136 | 137 || 139 | 140 |










© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.