WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!


Pages:     | 1 |   ...   | 137 | 138 || 140 |

Электрофоретическая подвижность измеряется при помощи специальных устройств, ос­новным узлом которых является прозрачная камера, позволяющая наблюдать движение эритроцитов в электромагнитном поле. Устройства отличаются друг от друга формой и раз­мерами камер. Наиболее широко распространены цилиндрическая [Abramson H., 1930] и ще­левая прямоугольная камеры [Харомоненко С.С, Ракитянская А.А, 1974]. Достоинства и не­достатки различных конструкций весьма подробно изложены в соответствующей литературе. Между тем результаты определения ЭФП в различных камерах мало отличаются друг от друга. Так, электрофоретическая подвижность эритроцитов, измеренная в цилиндрической камере, составляет 1,310~8 м2/Вс, а в камере С.С. Харамоненко — 1,321(Г м2/Вс.

Заряд эритроцита в среднем составляет (16—18)10~3 В. [Харамоненко С.С, Ракитян­ская А.А., 1974). Между тем существует точка зрения, что в действительности он несколько больше, а именно: (25,1±0,44)10~3 В [Мищук И.И., 1979]. Последний результат получен при помощи метода подвижной границы, разработанного автором. Предлагаемая методика в от­личие от существующих не требует разведения крови. Это весьма ценно, так как, с одной стороны, метод исключает изменение дзетапотенциала за счет нарушения существующего в цельной крови гидропонного равновесия, а с другой — соответствует современной тенден­ции в медицинской лабораторной технике — стремлению к сокращению времени и объема пробоподготовки.

Кроме того, обычно применяемые агарагаровые ключи часто выходят из строя вследст­вие ослизнения; в микрокамерах при электрофорезе, как правило, не удается избавиться от электроосмоса. Предлагаемый же метод подвижной границы лишен этих недостатков.

Заслуживает внимания метод определения ЭФП эритроцитов, предложенный Н.Д.

Китаевой и соавт. (1976). Электрофорез клеток крови проводят в камере Горяева.

При этом применяют плоские хлорсеребряные электроды, создающие весьма однородное электромаг­нитное поле с минимальным искривлением силовых линий в измерительном отделе камеры.

Если необходимо произвести более детальные исследования электрокинетического ком­понента суспензионной стабильности крови, целесообразно определять диэлектрическую проницаемость крови, а также ее электропроводность и тангенс угла потерь при помощи вы­сокочастотных мостов и другой аппаратуры.

Наряду с электрокинетическими свойствами эритроцитов следует определять их некото­рые простейшие геометрические параметры:

средний объем единичного эритроцита;

толщину отдельного эритроцита (ТОЭ);

показатель сферичности (а) [Кассирский Н.А., Алексеев Г.А., 1970]. Норма 3,4—3,9, а < 3,4 — предрасположенность к сфероцитозу, а > 3,9 — предрасположенность к пла ноцитозу;

распределение эритроцитов по объему;

построение кривой ПрайсДжонса.

Адгезивность форменных элементов — способность форменных элементов крови взаи­модействовать с сосудистой стенкой (осаждаться на ней) [Swank R., 1961].

A. Copley и соавт. (1960) предложили определять адгезивность форменных элементов по осаждению их на внутреннюю поверхность стеклянного капилляра из определенного объема крови, которая «прогоняется» по этому капилляру с известной скоростью или при известном давлении. В последнем случае измеряют время прохождения крови по данному капилляру, его длину, а затем скорость.

Толщину слоя осаждения (5) форменных элементов, характеризующую их адгезивные свойства, вычисляют по формуле:

s = RA 2Х ' где R — радиус капилляра; Д 1 — уменьшение длины основного индекса (пробы крови); X — длина слоя осаждения.

При пропускании проб крови через стандартный капилляр толщина слоя осаждения в норме составляет 4,7±0,3 мкм [Селезнев С.А. и др., 1976].

Таким образом, исследование реологических свойств крови включает комплекс мето­дик, требующих разнообразных, порой весьма трудоемких, вычислений. На схеме 10.2 пред­ставлены объем и алгоритмы комплексного реологического анализа.

Схема 10.2. КОМПЛЕКСНЫЙ РЕОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ КРОВИ Забор крови f Эритроцитная масса Плазма Цельная кровь Гепаринизация Цитрат натрия Геометрия эритроцитной массы Определение белкового спектра Определение относительной вязкости плазмы Агрегатометрия Определение гематокритного числа Реометрия цельной крови Определение механических характеристик эритроцитов Определение статического предельного напряжения сдвига Проба на «упаковку» Общие закономерности расстройств микрогемоциркуляции Расстройства кровотока в системе микрогемоциркуляции — неизбежный компонент почти каждого патологического процесса. Это и неудивительно, поскольку именно в данной части сердечнососудистой системы реализуется ключевой процесс жизнедеятельности орга­низма — транскапиллярный обмен. Эти расстройства характеризуются некоторыми общими закономерностями и проявляются довольно ограниченным числом патологических феноме­нов, органически связанных со структурнофункциональной организацией микрогемоциркуляторной системы (сосудистая стенка, кровь, периваскулярные образования). В соответст­вии с этим широко распространена классификация, согласно которой условно выделяют следующие типы нарушений микрогемоциркуляции: внутрисосудистые, внесосудистые и со­судистые.



Прежде чем дать описание расстройств микроциркуляции при различных заболеваниях, представляется целесообразным осветить несколько подробнее такие явления, как внутрисосудистая агрегация форменных элементов крови, синдром повышенной вязкости крови, со­судистые феномены изменения тонуса, реактивности и проницаемости.

Феномен внутрисосудистой агрегации форменных элементов крови Этот феномен обычно называют агрегацией эритроцитов, хотя, без сомнения, агрегаты содержат также и тромбоциты, и лейкоциты. Однако, учитывая, что количество эритроцитов в единице объема крови и агрегатах на одиндва порядка больше количества других форменных элементов, термин «агрегация эритроцитов» в целом соответствует действительности.

Механизмы возникновения и развития агрегации эритроцитов весьма сложны и много­образны. Они до сих пор уточняются. Вместе с тем среди этих механизмов уже теперь можно выделить те, которые имеют ведущее значение. Заслуга детального изучения феномена внут­рисосудистой агрегации эритроцитов принадлежит М. Knisely (1947, 1965). Обширный фак­тический материал собственных исследований и анализ работ других авторов позволили ему утверждать, что в норме ни у людей, ни у животных этот феномен практически не обнаружи­вается (подразумевается прижизненная агрегация эритроцитов).

Агрегаты эритроцитов при их образовании в патологических условиях закупоривают мелкие сосуды, ухудшают нутритивный кровоток и, таким образом, неблагоприятно влияют на транскапиллярный обмен [Knisely M. et al., 1947]. Крайнюю степень агрегации эритроци­тов принято обозначать термином «сладжинг» (sludging).

Необходимо различать агрегацию эритроцитов и их агглютинацию. Агрегация — процесс обратимый, тогда как агглютинация всегда необратима и обусловлена обычно иммунными факторами.

Результаты исследований обсуждаемого феномена с использованием метода реоскопии послужили основанием для деления эритроцитарных агрегатов на патологические и физиоло­гические [Goldstone Y. et al., 1970]. Было установлено, что патологические агрегаты резис­тентны к сдвигу и не распадаются, как физиологические, а, напротив, уплотняются. Их форма и ригидность также значительно отличаются от этих параметров физиологических аг­регатов.

Патологические агрегаты обычно очень быстро оседают.

Выделение понятия «физиологические агрегаты» не противоречит положению об отсут­ствии агрегации эритроцитов в норме, а лишь дает основание говорить о едином динамичес­ком процессе агрегация—дезагрегация, который постоянно протекает в крови. В норме дезаг­регация доминирует над агрегацией.

Установлено, что интенсивность процесса дезагрегации зависит от скорости деформа­ции. При увеличении градиента скорости число агрегатов в крови, сначала крупных, а затем и мелких (не более 30 клеток в одном агрегате), постепенно уменьшается, а при кри­тической скорости деформации наступает полная дезагрегация [Левтов В.А. и др., 1982; SchmidSchonbein H. et al., 1977].

Дезагрегация сопровождается увеличением текучести крови. Полное разрушение агрегатов наступает обычно при градиентах скорости 50—80 с"1. Это свидетельствует о преобладании при этих скоростях деформации гидродинамических сил потока, стремящихся разобщить эритроциты, над силами межэритроцитарного взаимо­действия. Эритроциты при этом переориентируются в потоке, стремясь обеспечить мини­мум диссипации энергии при наибольшей «устойчивости» [Шадрина Н.Х., 1976; Chien S., 1970].





Агрегация эритроцитов — один из важных факторов, обусловливающих нелинейность кривой течения крови. При низких скоростях деформации вклад агрегации в абсолютные значения эффективной вязкости максимален.

Результирующая направления процесса агрегация—дезагрегация в организме определя­ется взаимодействием по меньшей мере пяти факторов: гемодинамического, плазменного, электростатического, механического и конформационного.

Влияние гемодинамического фактора определяется зависимостью направления про­цесса агрегация—дезагрегация от напряжения сдвига и расстояния между отдельными клетками в потоке, которое, в частности, зависит от объемной концентрации эритроцитов в крови.

Плазменный и электростатический факторы определяют два основных механизма про­цесса агрегация—дезагрегация — мостиковый и электростатический. Сущность мостикового механизма заключается в том, что связующим элементом между эритроцитами в агрегате яв­ляются макромолекулярные соединения, концы молекул которых, адсорбированные на со­седних клетках, образуют своеобразные «мостики».

Подтверждением существования мости­кового механизма является то, что расстояния между эритроцитами в агрегатах пропорцио­нальны длине связующих макромолекул.

Применение в качестве индукторов агрегации декстранов с различной относительной молекулярной массой приводило к тому, что по мере возрастания относительной молекуляр ной массы декстрана расстояние между эритроцитами в агрегатах увеличивалось, оставаясь в то же время не больше длины молекулы соответствующего декстрана [Chien S. et al., 1975]. Основным пластическим материалом для межэритроцитарных мостиков в организме явля­ются фибриноген и грубодисперсные белковые фракции, в частности углобулины [Левтов В.А. и др., 1982; Asen P. et al., 1965].

Необходимым условием для реализации мостикового механизма является сближение эритроцитов на расстояние, не превышающее длину молекулы, образующей мостик.

Увели­чение концентрации эритроцитов способствует сближению клеток, а наличие сил электро­статического отталкивания, создаваемых так называемым дзетапотенциалом эритроцитов, препятствует ему. Уменьшение же дзетапотенциала в свою очередь ведет к ослаблению вза­имного отталкивания одноименно заряженных частиц — эритроцитов и, следовательно, спо­собствует сближению и агрегации клеток. Это влияние заряда проявляется при разных гра­диентах скорости неодинаково.

Исследование реологических свойств суспензий эритроцитов в различных средах при градиентах скорости 400—800 с~' показало, что при условиях, близких к существующим in vivo, дзетапотенциал не оказывает существенного влияния на их вязкость в этой области градиентов скорости [Сох Н., Su GougIen, 1965]. При ацидозе, накоплении лактата, истоще­нии щелочных резервов крови дзетапотенциал эритроцитов уменьшается, а способность клеток к склеиванию увеличивается [La Cour G. et al., 1970]. Большое значение для поверх­ностного заряда эритроцитов имеют сиаловые кислоты. Изучение действия нейраминидазы на эритроциты людей и животных позволило установить, что фактором, определяющим на­личие у эритроцитов дзетапотенциала, являются карбоксильные группы сиаловых кислот [Cook М. et al., 1961; Eylear E. et al., 1962].

Мостиковый и электростатический механизмы конкурируют между собой. Мощность первого из них определяется степенью связи, обеспечиваемой каждым из «мостиков», и общим количеством их. Электростатическая же сила отталкивания экспоненциально умень­шается с увеличением отношения межклеточного расстояния к толщине двойного электри­ческого слоя вокруг эритроцита [Chien S. et al., 1976].

Механизм фиксации на эритроцитах отрицательно заряженных макромолекул:

фибри­ногена, углобулинов и электрически нейтральных молекул полимеров (декстранов) пока не вполне ясен. Существует точка зрения, что сцепление молекул происходит за счет слабых во­дородных связей и дисперсных сил ВандерВаал ьса [Chren S., 1975].

Направление процесса агрегация—дезагрегация определяется результатом совокупного взаимодействия перечисленных механизмов.

Pages:     | 1 |   ...   | 137 | 138 || 140 |










© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.