WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!


Pages:     | 1 |   ...   | 83 | 84 || 86 | 87 |   ...   | 140 |

И те, и другие имеют свои плюсы и минусы. С одной стороны, первый тип подходов с определением универсального показателя состояния иммунной системы имеет несомненное преимущество, так как при этом отпадает необходимость конструирования сложных и порой громоздких схем для интерпретации получаемых результатов. Вместе с тем на основании ин­тегрального универсального показателя можно выявить только грубые изменения в иммун­ной системе, тогда как пограничные состояния остаются за пределами его детекции. Второй тип подходов с определением многочисленных параметров иммунного статуса, наоборот, дает более полное представление о состоянии иммунной системы и выявляет тонкие меха­низмы ее поражения, однако общая интерпретация получаемых данных бывает весьма за­труднительной, а порой и совсем неопределенной.

Предложенный в 1990 г. Л.В. Ковальчуком и А.Н. Чередеевым подход к оценке иммун­ной системы человека, базирующийся на патогенетическом принципе, получает свое даль­нейшее развитие. Сущность этого подхода заключается в использовании методических при­емов, позволяющих оценить основные стадии иммунного ответа — распознавания, актива­ции, пролиферации и дифференцировки. Помимо традиционных тестов (первого уровня), в основу патогенетического принципа положены рекомендации оценивать наиболее важные свойства жизнеобеспечения иммунокомпетентных клеток, ориентируясь на основные этапы их дифференцировки.

Для упорядочения основных процесов предложено оценивать способ­ность клеток иммунной системы к активации, пролиферации, дифференциации и регуля­ции.

Дальнейшие разработки в этой области подтвердили правильность указанных подходов к лабораторной диагностике состояния иммунной системы человека.

Оценка стадии распознавания антигена: изучение уровня Тклеточного антигенрас познающего рецептора на лимфоцитах, процесса представления антигена, числа адгезивных молекул (интегрины, адгезины и др.) на клетках, смешанной культуры лимфоцитов, генного анализа аллотипов HLA, ТКР.

Оценка стадии активации лимфоцитов: фенотипирование маркеров активации лим­ фоцитов (CD25, CD23, CD 69, HLADR) при стимуляции ФГА, выявление вторичных мес сенжеров (цАМФ, цГМФ, цАТФ), изучение отвечаемости клеток иммунной системы на ци токины.

Оценка стадии пролиферации лимфоцитов: изучение ответа лимфоцитов на митогены, специфические антигены, факторы роста.

Оценка стадии дифференциации лимфоцитов (эффекторной функции): изучение про­ дукции иммуноглобулинов, цитотоксической функции Тлимфоцитов, натуральных килле­ ров, продукции цитокинов.

Схема 7.1. АЛГОРИТМ ОЦЕНКИ КЛЕТОЧНОГО ЗВЕНА ИММУНИТЕТА ПРИ ИММУНОДЕФИЦИТАХ Больные с затяжными, хроническими воспалительными процессами бактериальной, вирусной, аутоиммунной природы, состояния после тяжелых оперативных вмешательств, ожогов Симптомы иммунодефицита V Количество Тлимфоцитов Соотношение популяций лимфоцитов Норма Адекватный иммунный ответ Тх/Тс 1,52, Снижено Иммунодефицит Тх/Тс <1, Повышено Аутоаллергия Тх/Тс >2, Функциональная активность в РТМЛ и РБТЛ Лейкоцитарно Тлимфоцитарный индекс у Норма Адекватный иммунный ответ Повышено Аутоаллергия \i Снижено Иммунодефицит Первая степень иммунодефицита (адекватный иммунный ответ, период адаптации) Вторая степень иммунодефицита (неадекватный иммунный ответ, пересмотр терапии) Третья степень иммунодефицита (смена терапии, назначение иммуномодуляции) 5. Оценка регуляции иммунного ответа: оценка хелперных и супрессорных функций лимфоидных клеток, анализ функциональных свойств Тхелперов 1го и 2го типов и проду­цируемых ими цитокинов.

Главное достоинство патогенетического принципа обследования иммунной системы заключается в упорядочивании тестов, оценивающих состояние важных и взаимосвязан­ных функций иммунокомпетентных клеток. Выделение подобных этапов функциониро­вания иммунных клеток открывает перед врачом новые подходы для понимания роли от­дельных клеточных элементов иммунной системы человека при многих иммунных нару­шениях.

Схема 7.2. АЛГОРИТМ ОЦЕНКИ ГУМОРАЛЬНОГО ЗВЕНА ИММУНИТЕТА ПРИ ИММУНОДЕФИЦИТАХ Больные с затяжными, хроническими воспалительными процессами бактериальной, вирусной, аутоиммунной природы, состояния после тяжелых оперативных вмешательств, ожогов Симптомы иммунодефицита Количество Влимфоцитов Соотношение популяций Влимфоцитов (IgA, igG.lgM) Норма Снижено Повышено Адекватный иммунный ответ Иммунодефицит — Аутоаллергия бактериальная инфекция у Сохранено Нарушено Количество иммуноглобулинов Лейкоцитарный индекс интоксикации Норма Адекватный иммунный ответ Норма (0,81,1) Снижены Хронизация воспалительного процесса <0, Повышены IgM Острая гнойная инфекция Повышены IgG Вторичная инфекция, реинфекция, период реконвалесценции первичной инфекции Повышены IgA Острая инфекция с вовлечением слизистых оболочек (мочеполовой, желудочнокишечный, респираторный тракты) Выраженная дисиммуноглобулинемия Гаммапатии, миелома Уровень ЦИК Повышен В настоящее время в литературе накоплен огромный фактический материал по механизмам активации, пролиферации и дифференцировке лимфоцитов [Чередеев А.Н., 1997]. Известны тонкие мембранные и внутриклеточные перестройки при этих процессах. Становится ясным, что врожденный или индуцированный разными факторами блок одного из названных ключевых этапов функционирования иммунокомпетентных клеток ведет к несостоятельности их полно­ценного функционирования. Данные последних лет свидетельствуют о качественно новой ин­терпретации тестов, применяемых для оценки иммунной системы, связанных с определением состояния активации лимфоцитов. Сегодня исследователи практически единодушны в том, что процесс активации иммунокомпетентных клеток в зависимости от ряда внешних и внутренних факторов может иметь по крайней мере два исключающих друг друга исхода, в связи с чем вы­двигается концепция позитивных и негативных последствий активации.



Схема 7.3. АЛГОРИТМ ОЦЕНКИ СИСТЕМЫ ФАГОЦИТОЗА ПРИ ИММУНОДЕФИЦИТАХ Больные с затяжными, хроническими воспалительными процессами бактериальной, вирусной, аутоиммунной природы, состояния после тяжелых оперативных вмешательств, ожогов \i Поглотительная способность фагоцитов \/ Количество активных фагоцитов, фагоцитарный показатель Фагоцитарная емкость крови, фагоцитарное число V Норма Снижено Повышено Адекватный иммунный ответ Иммунодефицит Острая бактериальная инфекция Т Норма Повышено Снижено \ Переваривающая способность фагоцитов (завершенность фагоцитоза, лКТтест) Окислительная способность фагоцитов или бактерицидность (НСТ, ОМГ) V Сохранена Адекватный иммунный ответ Сохранена \ i Снижена Иммунодефицит Снижена Аутоиммунитет Усилена После активации иммунокомпетентные клетки проходят типичный путь своего разви­тия, т.е. начинают пролиферировать и после этого дифференцируются в зрелые клетки, обеспечивающие эффекторные функции иммунной системы (позитивный процесс). Или тот же самый стимул, направленный на ту же популяцию клеток, но осуществленный в других условиях, может привести к совершенно противоположному эффекту — к запрограммиро­ванной гибели активируемой клетки, т.е. к феномену апоптоза (негативный процесс). Эти процессы наиболее существенны для Тлимфоцитов. Именно поэтому на сегодняшний день при оценке состояния активации лимфоцитов правомерным является определение типа активации, с которым имеет дело исследователь: позитивным или негативным. Данные факты и составляют суть методологического подхода при оценке процессов, связанных с ак­тивацией иммунокомпетентной клетки.

Позитивная активация лимфоцитов — сложный и многогранный процесс, реализуемый через биохимические события в мембране и в цитозоле клетки. На конечном этапе актива­ции Тлимфоцитов реализуются эффекторные функции: секреция цитокинов, цитотоксичность и др. Но прежде клетки проходят этап пролиферации, необходимый для накопления пула себе подобных клеток. Фазы активации, пролиферации и дифференцировки имеют свои особенности и могут быть оценены по следующим параметрам: повышение экспрессии CD25 антигенов и антигенов HLADR в ранней стадии активации, стимуляция роста активи­рованных Вклеток в стадии пролиферации, индукция синтеза иммуноглобулинов (в част­ности, IgE) в стадии дифференцировки.

Схема 7.4. АЛГОРИТМ ОЦЕНКИ СИСТЕМЫ КОМПЛЕМЕНТА ПРИ ИММУНОДЕФИЦИТАХ Больные с затяжными, хроническими воспалительными процессами бактериальной, вирусной, аутоиммунной природы, состояния после тяжелых оперативных вмешательств, ожогов Симптомы иммунодефицита \ \ Уровень компонентов комплемента \ \ Уровень СЗкомпонента комплемента Активность компонентов комплемента (по 50 % гемолизу) \ \ i Норма Адекватный иммунный ответ Сохранена <. ¦ \ i \ г \ Снижен Иммунодефицит Снижена f Повышен Острая бактериальная инфекция \ \ Уровень С4компонента комплемента Уровень Сlqкомпонента комплемента \ f \ f Норма Адекватный иммунный ответ Норма \ \ Повышен Иммунодефицит Снижен \ Снижен Острая бактериальная инфекция Ч Повышен t Уровень ЦИК Повышен В противовес классическим путям позитивной активации зрелые Тклетки, стимули­рованные через Тклеточные рецепторы, могут подвергнуться и клеточной гибели (нега­тивная активация), при которой решающую роль играет взаимодействие пары рецепторлиганд Fas/FasL. Активированные Тлимфоциты экспрессируют как тот, так и другой ре­цептор и становятся чувствительными к клеточной гибели, являющейся следствием связы­вания Fasрецептора. Такие клетки могут поставлять сигналы бедствия от одной клетки другой — процесс, получивший название «братоубийство». Поэтому наряду с методами, ха­рактеризующими процессы позитивной активации, назрела необходимость определения маркеров, по которым можно количественно охарактеризовать число клеток «самоубийц», подвергающихся апоптозу. Одними из таких маркеров являются антиген Fas (CD95, АПО1) и лиганд FasL. Fas относится к рецепторам фактора некроза опухолей. Он проводит апоптотический сигнал внутрь клетки. События апоптоза реализуются после соединения Fasантигена с FasLлигандом (антителом). У клеток, подвергающихся апоптозу, происхо­дят изменения в характере гликозилирования белков поверхностных мембран. Одним из маркеров таких изменений считается появление Lewis Yантигена, который обнаруживает­ся иммуногистохимическими методами. Как в нормальных, так и в опухолевых клетках по­казана хорошая корреляция между степенью апоптоза и величиной экспрессии антигена Lewis Y.





Схема 7.5. АЛГОРИТМ ОЦЕНКИ ЦИТОКИНОВОГО СТАТУСА ПРИ ИММУНОДЕФИЦИТАХ Больные с затяжными, хроническими воспалительными процессами бактериальной, вирусной, аутоиммунной природы, состояния после тяжелых оперативных вмешательств, ожогов J Уровень цитокинов V Уровень IL4, IL Уровень IL2, IL12, гаммаинтерферона V Норма Адекватный иммунный ответ Норма У Снижен Активность клеточного иммунного ответа Повышен Активность гуморального иммунного ответа Активность атопического иммунного ответа Уровень IL5, IL Уровень IL6, TNFб Повышен Острая бактериальная инфекция Снижен \ Иммунодефицит Снижен > Острая бактериальная инфекция Повышен > Хронизация воспалительного процесса Идентификация этих маркеров играет важную роль для заключения о направленности развития клеток иммунной системы, механизмах и течении иммунопатологии человека. На­пример, многие приобретенные иммунодефициты могут быть связаны с эффектом негатив­ной активации. Повышенный апоптоз ТЛимфоцитов рассматривается как один из ключе­вых механизмов иммунодефицита при ВИЧинфекции. Существует также концепция интерлейкинзависимых иммунодефицитов, согласно которой в основе этих дефицитов лежат на­рушения механизмов регуляции клеточной активации и пролиферации в зависимости от продукции и рецепции цитокинов IL1, IL2.

Экспериментальное обоснование получает и предположение о том, что в основе многих лимфопролиферативных и аутоиммунных заболе­ваний лежит процесс нарушения клеточного апоптоза по типу блока негативных процессов активации, в результате чего возникает неудержимая клеточная пролиферация, в том числе и «запрещенных» клонов лимфоцитов.

Таким образом, патогенетический подход к оценке иммунного статуса позволяет поно­вому осмыслить природу возникновения иммунопатологии. Распространенное утверждение о том, что иммунодефициты — это заболевания, связанные с недостаточностью функциони­рования иммунной системы, а аутоиммунные заболевания — патология с гиперфункцией иммунной системы, на сегодняшний день может оказаться лишь поверхностным. На самом деле, и иммунодефицитные, и аутоиммунные заболевания являются по своей сути процесса­ми чрезмерной активации иммунокомпетентных клеток, однако при иммунодефицитах их активация заканчивается гибелью, а при аутоиммунных дефицитах — активация приводит к накоплению аутореактивных клонов. Поэтому оценка иммунного статуса должна включать максимальный перечень тестов и показателей, характеризующих основные этапы активации, пролиферации и дифференцировки лимфоцитов, системы комплемента и фагоцитоза.

Pages:     | 1 |   ...   | 83 | 84 || 86 | 87 |   ...   | 140 |










© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.