WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!


Pages:     | 1 |   ...   | 85 | 86 || 88 | 89 |   ...   | 140 |

HLADRантиген представляет собой мономорфную детерминанту молекул II класса главного комплекса гистосовместимости человека (HLA). Маркер экспрессируется на клет­ ках Лангерганса, дендритных клетках лимфоидных органов, определенных типах макрофа­ гов, Влимфоцитах, активированных Тклетках и эпителиальных клетках вилочковой желе­ зы. В клинике определение маркера применяют для количественной оценки активирован­ ных Тлимфоцитов, имеющих фенотип CD3+ HLADR+.

Используя различный подбор моноклональных антител к маркерам, можно составить фенотипический портрет клеток, характерактерных для данной формы лейкоза (табл.

7.38).

Таблица 7.38. Иммунофенотипичекская характеристика лейкозов [Myers A.R., 1996) № п/п Иммуновариант лейкоза Доминирующий клеточный фенотип 2 4 10 11 12 13 15 ПредТклеточный острый лимфолейкоз Тклеточный острый лимфолейкоз «Нулевой» острый лейкоз laвариант острого лимфолейкоза ПроВклеточный лимфолейкоз (в рамках 1аварианта) «Общий» острый лимфолейкоз (препреВклеточный) ПреВклеточный острый лимфолейкоз Вклеточный острый лимфолейкоз Вариант острого лимфолейкоза с коэкспрессией миелоидных антигенов CD11Ь, CD МО (острый недифференцированный лейкоз) Ml (острый миелобластный лейкоз без созревания) М2 (острый миелобластный лейкоз с созреванием) МЗ (острый промиелоцитарный лейкоз) М4 (острый миеломонобластный лейкоз) М5 (острый монобластный лейкоз) Мб (острый эритромиелоз) М7 (острый мегакариобластный лейкоз) CD7+, CD5+, CD2+, CD3+, CD15, CD23, CD13, CD CD7+, CD5+, CD2+, CD3+, CD10, CD15, CD22, CD23, CD13, CD CD38+/, CD58+/, CDlla+/, CD1, CD5, CD7, CD8, CD10, CD19, CD22, CD23, HLADR, CD1 lb—, антиген эритробластов— CDlla+, CD38+, CD58+/, CDlc+ Ia+, CD19+, CD22+, CD34+/ CD19+, CD10++/, CD20+/. CD22+/~, CD34+/~, CD58+/, CD2, CD HLADR+, CD19+, CD10+/, CD58++/, CD2, CD3, CD13,CD Ia+/, CD2, CD3, CD фенотип «общего» ОЛЛ(1а+)+ CD1 lb+, CD15+ фенотип Т1ОЛЛ(1а+) + CDllb+, CD15+ фенотип laОЛЛ + CDHb+, CD 15+ фенотип ТОЛЛ + CDllb+, CD15+ фенотип «нулевого» ОЛЛ + CDllb+, CD15+ HLADR+, CD15+/, CD13+/, CD33+/ HLADR+/, CD38+/, CDlla+/, CD53+, CDllb+/, CD15+/, CD7+/ HLADR+/, CD38+/, CD72+, CD53+, CDllb+/, CD7+/, CDllb++/, CDlla+/, CD15++/ CD53+, CDllb+/—, CD15+/—, HLADR+/—, CD38, CD2, CD3, CD4, CD8, CD19, CD HLADR+, CD15+, CD38+, CDllb+ HLADR+, CDllb+, CD15+, CD Гликофорин А+ антиген эритробластов, HLADR+/—, CD CD38+, CD41 +, HLADR+/, CD7+/, CD4, CD8, CDllb, CD15, CD33, CD10, CD34, CD Примечание: «+» — выраженная экспрессия; «+/—» — вариабельность экспрессии; «—» вие экспрессии антигена.

отсутст Помимо использования методов иммунофенотипирования для диагностики и диффе­ренциальной диагностики гемобластозов, особенно важным оказалось их применение в про­цессе лечения для оценки состояния ремиссии и остаточной популяции лейкозных клеток. Зная фенотипический «портрет» бластных клеток в период установления диагноза, по этим маркерам можно обнаружить клетки лейкозного клона в период ремиссии, а по нарастанию их количества — предсказать развитие рецидива задолго (за 1—4 мес) до появления его клиникоморфологических признаков [Воробьев А.И., 1995]. Возможность прогнозирования и ранней диагностики рецидивов острого лейкоза позволяет своевременно изменить или ин­тенсифицировать программу лечения больного во избежание его полного развития. Именно использование методов иммунофенотипирования позволило зарубежным клиникам достичь больших успехов в лечении гемобластозов. В настоящее время ведутся исследования по ис­пользованию полимеразнои цепной реакции для обнаружения в пробах костного мозга и пе­риферической крови бластных клеток при острых лейкозах.

21* АНАЛИЗ КЛЕТОЧНОГО ЦИКЛА КЛЕТОК КОСТНОГО МОЗГА ПО СОДЕРЖАНИЮ ДНК Исследование позволяет дифференцировать клетки костного мозга по фазам синтеза ДНК (стадии Gl, S, G2+m). Большинство клеток костного мозга делятся через разные про­межутки времени. Отрезок времени между концом одного митоза и концом следующего на­зывается клеточным циклом. Весь цикл распадается на две части:

процесс деления (митоз) и подготовка к нему (интерфаза). Удвоение ДНК происходит в интерфазе, причем начинается задолго до митоза и заканчивается также до его начала. Период синтеза ДНК называется Sпериодом; промежуток между окончанием митоза и началом Sпериода называется Glneриодом, промежуток между окончанием Sпериода и началом митоза — С2периодом. В ин­терфазы происходит удвоение не только ДНК, но и всей массы клетки. Рост клетки идет в течение всех периодов интерфазы, но особенно быстро — во второй ее половине — в S и С2периодах. В это время очень интенсивно синтезируются РНК и белок. К началу митоза синтетические процессы замирают и возобновляются в следующей интерфазе.



Таблица 7.39. Параметры клеточного цикла миелокариоцитов при различной патологии [Шмаров Д.А., 1997] Заболевания Sфаза, % G2+m, % G1/0, % S+G+m. % S/(G2+m), % Здоровые 12,3±0, 3,8±0, 83,9±0, 16,2±0, 3,34±О, Лейкозы (дебют или рецидив):

• острый миелобластный лейкоз, 10,6±0, 2,55±0, 85,2+1, 14,5±1, 4,45±0, • острый лимфобластный лейкоз, 15,7±1, 4,0±0, 80,3±1, 19,7±1, 4,73±0, • лимфосаркома с лейкемизацией, 14,9±1, 2,89±О, 82,4±1, 17,8+1, 6,62+1, • бластный криз хронического миелолейкоза 14,7±1, 3,28±О, 81,8±1, 18,0+1, 5,О±О, Лейкозы, ремиссия:

• острый миелобластный лейкоз, 15,6±1, 4,20±0, 80,0+1, 19,8±1, 4,0±0, • острый лимфобластный лейкоз, 15,2±0, 4,83±0, 79,8±1, 20,2±1, 3,88±0, • лимфосаркома с лейкемизацией, 14,5±1, 5,24+1, 80,1+2, 19,8±2, 4,0±0, • хронический миелолейкоз 12,4±1, 3,72±0, 83,8±1, 16,2±1, 3,71±0, Анемии:

• железодефицитная, 12,7±0, 3,76±0, 83,6±О, 16,4±0, 3,37±О, • пернициозная, 36,1±3,О 6,28±0, 57,6±2, 42,3±2, 7,40±1, • аутоиммунная гемолитическая, 20,4±1, 5,95±0, 73,7±1, 26,3±1, 3,50±0, • апластическая 7,63±1, 1,98±О, 90,4±0, 9,6±1, 4,22±О, Большинство специализированных клеток костного мозга либо не делятся совсем, либо делятся чрезвычайно редко и не находятся в митотическом цикле.

Теоретически выход кле­ток из митотического цикла возможен в любой период интерфазы (Gl, S и G2), но практи­чески абсолютное большинство выходят из стадии G1. Выход из цикла может быть обрати­мым (под воздействием какихто факторов клетка может приступить к синтезу ДНК и разде­литься, например, лимфоциты периферической крови входят в цикл и делятся под воздейст­вием ФГА) или необратимым (гранулоциты крови при гемобластозах). Клетки костного мозга, которые находятся в митотическом цикле, могут проходить его с различной скорос­тью. Быстрее всего его проходят клеткипредшественницы зрелых форм (у морфологически недифференцируемых клетокпредшественниц гемопоэза цикл составляет около 8 ч). Опре­деление содержания ДНК в каждой клетке клеточной суспензии позволяет получить распре­деление клеток по различным фазам клеточного цикла.

Анализ клеток костного мозга проводят с использованием ДНКспецифических красите­лей, возбуждающихся в ультрафиолетовой области. Выявление самых незначительных разли­чий во флюоресценции позволяет идентифицировать анеуплоидные, а также активно пролиферирующие клетки. По соотношению делящихся и специализированных клеток в костном мозге можно судить о состоянии костного мозга, а у больных с гемобластозами заблаговремен­но предсказывать развитие бластного криза. Изучение митотического цикла клеток костного мозга по содержанию ДНК позволяет выявлять клетки метастатических новообразований, диагностировать и следить за течением гемобластозов, оценивать функциональное состояние костного мозга. Наиболее оптимальную информацию о состоянии костного мозга можно по­лучить при одновременном анализе содержания ДНК в клетках костного мозга и определении антигенов на оболочке этих клеток с помощью моноклональных антител к различным антиге­нам, экспрессируемым той или иной популяцией клеток костного мозга. Параметры клеточ­ного цикла миелокариоцитов при различной патологии представлены в табл. 7.39.

Анализ цикла клеток костного мозга с целью выявления ДНК проводят для диагностики бластных кризов при лимфопролиферативных заболеваниях, дифференциальной диагности­ки анемий, а также для выявления патологии созревания и дифференцировки клеток кост­ного мозга.

ДИАГНОСТИКА РЕВМАТИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ В настоящее время к ревматическим заболеваниям относят большое число заболеваний, в основе которых лежит системное или локальное поражение соединительной ткани, а наи­более ярким клиническим проявлением служит поражение суставов. На III Всесоюзном съезде ревматологов (1985) была принята Рабочая классификация и номенклатура ревмати­ческих заболеваний (ВНОР), согласно которой все формы ревматических болезней распре­делены на 14 рубрик:





1) ревматизм (ревматическая лихорадка); 2) диффузные болезни соеди­нительной ткани (основные формы — системная красная волчанка — СКВ, системная скле­родермия, диффузный фасцит, дерматомиозит/полимиозит, болезнь Шегрена, смешанные заболевания соединительной ткани и др.); 3) системные васкулиты (узелковый полиартери­ит, гранулематозные артерииты, гиперергические ангииты, облитерирующий тромбангиит, синдром Бехчета); 4) ревматоидный артрит; 5) ювенильный артрит; 6) анкилозирующий спондилоартрит (болезнь Бехтерева); 7) артриты, сочетающиеся со спондилитом; 8) артриты, связанные с инфекцией; 9) микрокристаллические артриты; 10) остеоартроз; 11) другие бо­лезни суставов;

12) артропатии при неревматических заболеваниях; 13) болезни внесуставных мягких тканей; 14) болезни костей, хряща и остеохондропатии.

Для лабораторной диагностики ревматических заболеваний применяется целый ком­плекс показателей, часть из которых (общеклиническое исследование крови, СОЭ, общекли­ническое исследование мочи, суставной жидкости, биохимические показатели, исследование иммуноглобулинов, циркулирующих иммунных комплексов, криоглобулинов, показателей системы комплемента и др.) рассмотрена в других главах книги. В данном разделе приведено диагностическое значение исследования антинуклеарных факторов, антител к ДНК, к анти­генам RNP, Sm, SSA(Ro), SSB(La), к фосфолипидам, определение ревматоидного фактора, антител к стрептолизинуО, Среактивного белка.

Исследование крови на клетки красной волчанки (LEклетки) LEклетки в крови в норме отсутствуют.

Волчаночные клетки служат морфологическим проявлением иммунологического фено­мена, характерного для системной красной волчанки. Они образуются в результате фагоци­тоза нейтрофильными лейкоцитами (реже моноцитами) ядер клеток, содержащих деполимеризованную ДНК. Фагоцитируемая субстанция представляет собой иммунный комплекс, со­стоящий из волчаночного фактора (антинуклеарный фактор — антитела класса IgG к ДНКгистоновому комплексу), остатков ядра лейкоцитов и комплемента. Обнаружение LEклеток — специфический симптом системной красной волчанки. Исследование необходимо проводить до начала кортикостероидной терапии. Отрицательный результат исследования не исключает возможность данного заболевания. LEклетки обнаруживаются в раннем периоде болезни, а также при выраженном нефротическом синдроме и потере с мочой большого ко­личества белка. Волчаночный фактор может содержаться в пунктате костного мозга, в белко­вых жидкостях (экссудаты, мочевой белок при поражениях почек). Частота обнаружения LEклеток у больных острой системной красной волчанкой колеблется от 40 до 95 %. У больных системной красной волчанкой можно обнаружить, вопервых, волчаночные клетки, вовто­рых, свободное ядерное вещество (гематоксилиновые тельца, тельца Харгрейвса) и, втре­тьих, «розетки» — скопление нейтрофилов вокруг волчаночных клеток. Чаще волчаночные клетки находят при обострении заболевания. Появление их в большом количестве — про гностически неблагоприятный признак. При улучшении состояния больного в процессе его лечения количество LEклеток уменьшается, а иногда они и совсем исчезают.

От истинных LEклеток нужно отличать так называемые tartклетки и ложные волчаночные Вклетки. Они отличаются от LEклеток по морфологическим признакам и диагнос­тического значения для системной красной волчанки не имеют.

LEфеномен наблюдается, хотя и редко (до 10 % случаев), при плазмоцитоме, тяжелых поражениях печени, острых лейкозах, остром ревматизме, эритродермиях, милиарном тубер­кулезе, пернициозной анемии, при непереносимости антибиотиков — пенициллина и осо­бенно апресолина (гидролизина), при узелковом периартериите, гемолитической анемии, тромбоцитопенической пурпуре. При этих заболеваниях единичные волчаночные клетки об­наруживаются непостоянно.

Титр антител к нуклеарным антигенам (антинуклиарный фактор) в сыворотке У здоровых людей титр антител к нуклеарным антигенам в сыворотке менее 1:50.

Pages:     | 1 |   ...   | 85 | 86 || 88 | 89 |   ...   | 140 |










© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.